מדריך רה-קונסטיטוציה של פפטידים
הוראות שלב אחר שלב להכנת פפטידים למחקר מעבדתי בצורה נכונה ובטוחה.
מהי רה-קונסטיטוציה?
רה-קונסטיטוציה היא תהליך המרת פפטיד מצורת אבקה יבשה (lyophilized) לתמיסה נוזלית על ידי הוספת ממס מתאים, בדרך כלל מים חיידקיים סטריליים (Bacteriostatic Water) או מי מלח סטריליים.
תהליך זה חיוני לשימוש במחקר מעבדתי, שכן פפטידים רבים מסופקים בצורה יבשה לשמירה על יציבות לאורך זמן.
ציוד נדרש
מים חיידקיים סטריליים
Bacteriostatic Water או Sterile Saline
מזרקים סטריליים
1-3 מ"ל עם סימוני מדידה מדויקים
מחטים סטריליות
גודל מתאים (בדרך כלל 27-30 gauge)
אלכוהול לחיטוי
70% isopropyl alcohol swabs
תהליך רה-קונסטיטוציה שלב אחר שלב
הכנת סביבת עבודה
- נקה את משטח העבודה עם אלכוהול
- רחץ ידיים היטב או השתמש בכפפות סטריליות
- הכן את כל הציוד הנדרש
חישוב נפח המים
חשב את כמות המים הנדרשת על בסיס כמות הפפטיד והריכוז הרצוי.
דוגמה:
5mg פפטיד + 2ml מים = ריכוז של 2.5mg/ml
הוספת המים
- חטא את פקק הגומי של הבקבוקון עם אלכוהול
- משוך את כמות המים הנדרשת למזרק
- הזרק את המים לאט לאורך דופן הבקבוקון (לא ישירות על האבקה)
המסה עדינה
- סובב בעדינות את הבקבוקון בתנועות מעגליות
- אל תנער בחוזקה - זה עלול לפגוע בפפטיד
- המתן עד שהאבקה תימס לחלוטין (תמיסה צלולה)
טיפים חשובים
אל תנער בחוזקה
ניעור חזק עלול לגרום לדנטורציה של הפפטיד ולפגוע ביעילותו. תמיד סובב בעדינות.
הימנע מהזרקה ישירה
הזרק את המים לאורך דופן הבקבוקון, לא ישירות על האבקה. זרם חזק עלול ליצור קצף ולפגוע בפפטיד.
שמור על סטריליות
חטא את כל המשטחים והפקקים לפני השימוש. זיהום עלול לפגוע באיכות המחקר.
אחסן מיד לאחר ההכנה
לאחר רה-קונסטיטוציה, אחסן את הפפטיד במקרר (2-8°C) מיד. אל תשאיר בטמפרטורת החדר.
כל התרכובות מסופקות אך ורק למטרות מחקר מעבדתי. לא מיועד לצריכה אנושית.